掌握二氧化碳培养箱规范使用方法是确保实验可重复性的关键
二氧化碳培养箱是细胞培养、微生物实验及组织工程中的核心设备,通过精确控制温度、CO2浓度和湿度,模拟体内生理环境,保障细胞稳定生长。然而,若操作不当、维护缺失或消毒不到位,易导致污染、参数漂移甚至细胞死亡。掌握二氧化碳培养箱科学、规范的使用方法,是确保实验可重复性与生物安全的关键。

一、使用前准备
查参数校准:确认温度、CO2传感器经计量校准(建议每年一次);
查内腔清洁:使用前用75%酒精或专用消毒剂擦拭内壁、搁板及水盘,杜绝霉菌与支原体残留;
查水质与气体:水盘加注无菌蒸馏水或去离子水(防结垢),CO2气源纯度≥99.99%,配备0.22μm过滤器防污染。
二、规范操作流程
预热与平衡:
开机后至少预热4–6小时,待温度、CO2浓度、湿度稳定后再放入样品;
避免频繁开门,每次开门时间≤30秒,防止环境剧烈波动。
样品放置:
培养皿/瓶勿紧贴内壁或遮挡传感器;
液体容器加盖,防止交叉污染与水分过度蒸发。
运行监控:
启用超温、低水位、CO2异常等报警功能;
记录每日运行数据(可选配数据记录仪或联网系统)。
三、关键控制要点
湿度管理:水盘每周更换无菌水,避免滋生细菌;部分机型采用红外湿度控制,无需水盘,更洁净;
CO2控制方式:
红外(IR)传感器:不受湿度干扰,精度高(±0.1%),推荐用于长期培养;
热导(TC)传感器:成本低,但湿度变化易致漂移,需频繁校准;
温度均匀性:选择带风扇强制对流机型,确保腔内温差≤±0.2℃。
四、日常维护与消毒
每周:清洁水盘、搁架,检查门封条是否老化;
每月:执行高温湿热灭菌(如90℃/2h)或H2O2干雾灭菌(适用于无水盘机型);
每季度:校验传感器,清理进气过滤器。